Soluble Expression and Purification of Q59L Mutant L-asparaginase in the Presence of Chaperones in SHuffle™ T7 strain

Authors

  • Abdolnabi Tollabi Department of Medical Biotechnology, Faculty of Medicine, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran
  • Elham Biglari Goliloo Department of Medical Biotechnology, Faculty of Medicine, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran
  • Hossein Zarei Jaliani Department of Medical Biotechnology, Faculty of Medicine, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran
Abstract:

Background and Aims: Q59L mutant of L-asparaginase enzyme from Escherichia coli (E. coli) has been introduced with lower side effects. This version of the enzyme might have potential applications in the treatment of leukemia patients. We utilized SHuffle T7 strain of E. coli, to produce the mutant enzyme in the presence of chaperone molecules. Materials and Methods: Q59LAsp gene was cloned into pET28a expression vector, and two strains of E. coli (BL21 DE3 and SHuffle T7 strains) were used to produce recombinant protein. In parallel, PG-Tf2 plasmid was cloned into the same strains, and the effect of trigger factor chaperone and groELS chaperonines was studied. The his-tagged recombinant protein was expressed and purified using nickel affinity chromatography. The amount of recombinant protein which is produced in each condition was determined and compared. Results: The amount of soluble recombinant protein was enhanced in the presence of chaperones in both strains of E. coli. SHuffle T7 strain produced more soluble recombinant protein in the soluble state than BL21 DE3 strain. So the best condition for the production of soluble recombinant Q59L mutant protein was the use of PG-Tf2 plasmid in the SHuffle T7 strain. Conclusion: Application of the new strain SHuffle T7, with chaperones simultaneously showed better results in the production of Q59L mutant version of L-Asparaginase.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

the analysis of the role of the speech acts theory in translating and dubbing hollywood films

از محوری ترین اثراتی که یک فیلم سینمایی ایجاد می کند دیالوگ هایی است که هنرپیش گان فیلم میگویند. به زعم یک فیلم ساز, یک شیوه متأثر نمودن مخاطب از اثر منظوره نیروی گفتارهای گوینده, مثل نیروی عاطفی, ترس آور, غم انگیز, هیجان انگیز و غیره, است. این مطالعه به بررسی این مسأله مبادرت کرده است که آیا نیروی فراگفتاری هنرپیش گان به مثابه ی اعمال گفتاری در پنج فیلم هالیوودی در نسخه های دوبله شده باز تولید...

15 صفحه اول

the crisis of identity in jhumpa lahiris fiction: interpreter of maladies and the namesake

شکل گیری هویت(identity) مقوله مهمی در ادبیات پراکنده مردم(diasporan literature) می باشد. آثار جومپا لاهیری(jhumpa lahiri) ، نویسنده هندی آمریکایی، در سالهای اخیر تحسین منتقدین را به خود معطوف کرده است. وی در این آثار زندگی مهاجران و تلاش آنان برای پیدا کردن جایگاهشان در یک فرهنگ بیگانه را به تصویر کشیده است. این تجربه همواره با احساساتی نظیر دلتنگی برای گذشته، بیگانگی و دوری همراه است. با این ح...

15 صفحه اول

ideological and cultural orientations in translation of narrative text: the case of hajji baba of isfahan

در میان عواملی که ممکن است ذهن مترجم را هنگام ترجمه تحت تأثیر قرار دهند، می توان به مقوله انتقال ایدئولوژی از طریق متن یا گفتمان اشاره کرد. هدف از این تحقیق تجزیه و تحلیل جنبه های ایدئولوژیکی و فرهنگی متن مبدأ انگلیسی نوشته جیمز موریه تحت عنوان سرگذشت حاجی بابای اصفهانی ( 1823) و ترجمه فارسی میرزا حبیب اصفهانی(1880) بوده است.

the stady and analysis of rice agroclimatology in lenjan

the west of esfahan province, iran, is one of the most important agricultural areas throughout the country due to the climate variability and life-giving water of zayanderood river. rice is one of the major and economic crops in this area. the most important climatic elements in agricultural activities which should be considered include temperature, relative humidity, precipitation and wind. so...

15 صفحه اول

the survey of the virtual higher education in iran and the ways of its development and improvement

این پژوهش با هدف "بررسی وضعیت موجود آموزش عالی مجازی در ایران و راههای توسعه و ارتقای آن " و با روش توصیفی-تحلیلی و پیمایشی صورت پذیرفته است. بررسی اسنادو مدارک موجود در زمینه آموزش مجازی نشان داد تعداد دانشجویان و مقاطع تحصیلی و رشته محل های دوره های الکترونیکی چندان مطلوب نبوده و از نظر کیفی نیز وضعیت شاخص خدمات آموزشی اساتید و وضعیت شبکه اینترنت در محیط آموزش مجازی نامطلوب است.

the role of russia in transmission of energy from central asia and caucuses to european union

پس ازفروپاشی شوروی،رشد منابع نفت و گاز، آسیای میانه و قفقاز را در یک بازی ژئوپلتیکی انرژی قرار داده است. با در نظر گرفتن این منابع هیدروکربنی، این منطقه به یک میدانجنگ و رقابت تجاری برای بازی های ژئوپلتیکی قدرت های بزرگ جهانی تبدیل شده است. روسیه منطقه را به عنوان حیات خلوت خود تلقی نموده و علاقمند به حفظ حضورش می باشد تا همانند گذشته گاز طبیعی را به وسیله خط لوله مرکزی دریافت و به عنوان یک واس...

15 صفحه اول

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 8  issue 2

pages  138- 146

publication date 2021-05

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Keywords

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023